伦敦奥运会，东道主主播台BBC的全媒体阵容让业内印象深刻，“奥运电视网”NBC对在线节目的整合力度远胜以往。。
9月11日，伦敦残奥会闭幕第二天，中国网络电视台（CNTV）即邀请各方人士就本届奥运会的新媒体传播效果进行研讨，会上，CSM媒介研究、DCCI（互联网数据中心）、北京益派市场咨询有限公司联合了有关CNTV奥运传播效果调查的研究结果。
统一品牌“5+”
“新媒体、新品牌，全媒体、全覆盖”是CNTV在本届奥运会转播过程中的核心。
与过去各业务独立运作、体系分离不同，伦敦奥运会CNTV用“5+”这个统一品牌让“一云多屏”的布局更清晰。CNTV对“5+”的期望是借助本次奥运传播营销，让其成为中国体育新媒体品牌的NO.1。
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针对用户云端个性化定制信息可多终端同步的特点，“5+”品牌推出了适用于各版本系统、各智能终端的体育客户端产品，每个用户都可以有自己个性化的首页，可以随时定制自己喜欢的项目和电视栏目，能够一键直达各类赛事。
。”CNTV体育中心负责人表示。
；近八成的受众使用了客户端播放器，适用于多平台、多终端的客户端有效提升了CNTV的用户黏性。
“一云多屏”
作为广电新媒体的重要代表，CNTV拥有开展各项新媒体业务的牌照，而各牌照都有规定的业务开展期限。
“这不是想做不想做的问题，而是必须要做。”CNTV总经理汪文斌说，CNTV这几年最核心的任务是完成平台建设，尽管过程艰难，投入巨大，有些业务效果不甚明显，但碎片化和交互性作为一种媒介趋势不容回避，这也是CNTV未来各渠道传播与营销的指导思想。
CNTV有关伦敦奥运会的各项筹备，早在北京奥运会后就已启动。。“一云多屏，数据在云端，内容同步分发”，为了做到这一点，CNTV以用户体验为出发点，细致研究用户的观赛习惯与需求，并结合移动终端传播的特点推出个性化的定制服务，包括赛事提醒、推送、预约等。
“互联网竞争是强者恒强，长尾化的，但一定有一些细分的领域可以去做，从这个角度说，CNTV‘一云多屏’的战略是正确的。”易观国际IT&新媒体行业中心总经理田峥分析。
不过，多屏只是全媒态的一个基础，艾瑞咨询集团联合总裁兼首席运营官阮京文就认为，CNTV这次的多屏“更多是对奥运内容的播出，屏与屏之间的联动不足”。“一云多屏的基础应该是一网多屏，一云多屏如果放在多网多屏上，会造成力量的分散和资源的损耗，最终不利于一云多屏战略的实现。”DCCI总裁胡延平说。
移动终端崛起
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8月7日，田径110米栏预赛，CNTV直播瞬间并发量高达220万UV，如此大规模的流量并发，检验着CNTV自2008年以来积淀下来的技术能力。。
除了内容的丰富性、产品的多样性，传播的时效性同样不可或缺。
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伦敦奥运会期间，CNTV移动平台用户增量达200万。。
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电视与网络共融
。像张斌主持的不少节目既是电视的，也是网络的，网络不再是对传统电视的简单复制，电视+网络产生的新产品正逐渐被受众所接受。
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。这场新媒体奥运盛典，设计了“文体1+1”的“文体混搭”样式，孙楠和李小双、齐秦和钱红、陈楚生和赵蕊蕊、李玉刚和谢杏芳、何洁和邢傲伟、胡夏和刘璇等文体明星同台献艺。
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更自由的选择
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“自由一定是新媒体带来的。”央视体育频道副总监、主持人张斌认为。这种自由有多重含义，其中之一是让每个人的内心和需求有相对自由的碰撞和自由的感知，新媒体对电视体育的传播有向新的自由世界过度的趋势，“不再受单一屏幕的限制，不再受单一时间点的约束，也不再受单一机构的约束。”
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。 15万条。
多样成就自由，自由吸引更多用户。。
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北京大学新闻与传播学院广告系主任陈刚认为，全媒体时代的竞争主要体现为入口和终端的竞争，现在终端是开放性的，最终大家争夺的是入口。过去互联网的入口是门户，目前微博成为越来越多流量的入口，百度、360也是一个入口，内容和话题影响着受众的选择，CCTV最优质的战略资源就是新闻和体育，而体育又是可以充分挖掘的娱乐资源。
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CNTV伦敦奥运会传播效果研究摘要
本次调查由CSM媒介研究、DCCI（互联网数据中心）、北京益派市场咨询有限公司联合进行，主要从网络流量、网络口碑、传播效果三方面展开，主要调查结果如下：
1、观众特征
CNTV奥运观众整体呈现出年轻化、高知化等特点。10-39岁年轻人群占79.9%，大学本科及以上学历者占47.8%，专业技术人员（教师＼医生＼工程师等）、学生、公务员＼普通职员＼雇员三类职员人群占67.2%。网台互动传播，CNTV与CCTV奥运观众形成互补。
2、用户媒介触点路径
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3、用户观看集中度
72.3%的CNTV奥运观众在CNTV上收看了赛事直播，因“可以收看电视上没有的独家奥运赛事”收看CNTV的比例达到43.1%；在CNTV上收看CCTV奥运栏目的观众比例较互联网整体水平高出15%；。
4、各终端使用率
电视、互联网是收看奥运赛事的主要渠道，CNTV奥运观众中，八成观众同时使用电视、互联网收看，移动终端的使用率为36.2%。手机电视使用率为16.1%，户外电视15.5%，车载移动电视11.4%，楼宇电视11.1%，IPTV6.5%。
5、客户端使用率
。按客户端使用率由高至低依次是：5+体育PC桌面版客户端41.5%，C-BOX桌面客户端33.8%，C-BOX家庭版（PC+TV）30.7%，5+体育Andriod版28.4%，5+体育iPad版21.8%，C-BOX CCTV 5+版20.5%，5+体育MAC版18.5%，C-BOX移动客户端18.4%。
6、直播与点播应用
CNTV奥运观众中，72.3%的收看过奥运赛事直播，66.6%的收看过奥运赛事点播，48.7%的既使用过直播，也使用过点播。
7、访问时长
奥运期间，CNTV奥运频道群的总访问时长累积达9917万小时，人均总访问时间超过49分钟，人均总访问频次6.1次；。
8.奥运观众时间分配
；白天收看点播的观众比例更高，晚间收看直播的观众比例更高；移动终端用户工作日午间段收看CNTV的比例明显较高。
9、移动终端收看空间
在家里87.9%，在工作单位63.3%，在学校16.7%，在路上或各种交通工具上51.4%，在餐厅、酒吧、公园、机场等公共场所45.7%。
10、奥运广告品牌传播效果
CNTV平台的奥运广告中，可口可乐、阿迪达斯和一汽大众的用户接触最广；可口可乐、肯德基广告令人“印象最深刻”；近六成奥运观众积极响应印象深刻的广告。
；中性情感倾向占70%，负面15.6%。
内涵 特征 传播效果
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。。依托体育赛事这一主干，才有了其他信息资源存在的理由和附着的基础，它不仅可以使身处不同空间的电视观众在同一时间同步体验事件发展的全过程，还能最大限度地提供全方位、多角度、深层次的新闻信息，最大程度地满足受众的信息需求。。；。
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预知新闻要素的可策划性。。例如，第十届全运会开幕式前，央视体育频道已经就开幕式电视转播制订了详尽的转播计划，其中包括提前在体育场内搭建摄像专用平台，架设102倍和70倍长焦镜头，以便清楚地反映主席台上的各位贵宾；主体育场最上一层放置的摇臂摄像机，展示体育场拱顶的动感全景画面：在体育场顶部架设高空马道，俯拍文艺表演时大型队列变化的艺术效果；在奥体中心对面的紫金中华广场楼顶架设远景机位，把奥体中心的恢弘外景纳入人们的视线。因为开幕式进行时不能航拍，央视还提前把空中鸟瞰南京的情景收入素材库。
。。例如比赛双方的交锋历史，各自对比赛的赛前看法，比赛双方的技战术特点，运动员伤病情况，比赛地天气情况，比赛场地情况，对参赛者的赛前现场采访等，就时间顺序上来看基本属于过去时态；。。
。。。2002年法国世界杯、2006年德国世界杯电视转播权售价均为2498万美元；美国国家广播公司作为2008年北京奥运会转播权的中标电视机构，投入8亿多美元取得北美地区的转播权；；在国内，上海文广集团投入1.5亿元方才拿下2004年-2006年3年中超转播权。
多系统、多工种配合的复杂性。。
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时效性强，覆盖面广。。。。另外，电视信号覆盖面广。尤其是卫星信号，只要具备接收条件，全球观众都能同步异地观看同一场赛事转播，这使得电视观众人数大大增加。
真实性和现场感强。。。其一，电视转播是多角度画面切换，一场比赛少则两三个机位，多则十几甚至几十个机位，一个机位就是一个视角，十几个机位就是十几个视角，转播导演可以随时选择最清晰、最精彩、最能表现现场情况的机位画面提供给电视观众。其二，电视转播可以提供近景甚至特写镜头，电视观众可以近距离观赏到运动员细微的表情动作，也可以近距离观看到现场其他景物的细节。其三，电视转播可以提供慢镜头回放，电视观众可以通过慢镜头再次欣赏精彩的比赛瞬间，有机会看清楚之前没有看到或者没有看清楚的动作。。
全方位多层次的信息提供。。。。。。。
可视性、参与感强。。。
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参考文献：
1、欧阳宏生：《广播电视学导论》，四川大学出版社，2007年版。
2、陈国强：《国外体育赛事电视转播带给我们的理念》，《中国广播电视学刊》，2005(9)。
3、李凫荣：《新闻学概论》，复旦大学出版社，2001年版。
。本次大赛的主题是“三花妙厨艺，我秀我才艺” ，旨在推荐使用雀巢“三花”植脂淡奶所制作的易于推广，创新实用的中餐热菜和中式面点。
大赛总决赛于12月16日下午在北京海航万豪大酒店隆重举行。总决赛由雀巢专业餐饮与中国烹饪协会联合举办。中国烹饪协会刘秀军副会长、雀巢专业餐饮大中华区商务总监吕杰龙先生(Jeroen Puijmers)、雀巢专业餐饮中国大陆地区经理黄行毅先生等嘉宾出席了本次比赛。为了确保比赛的评判合理与公平竞艺，大赛组委会特别邀请了郑秀生、杨林，王海东，郑邵武，谭金强、宋军，赵志森、侯德成等餐饮界重量级人物担任赛事评委。组委会更邀请了中国唯一亚洲大厨，中国烹饪大师屈浩先生担任大赛的嘉宾主持。
本次比赛分为中餐热菜组与中式面点组。来自全国各地的20位优秀选手同台竞技，呈现了雀巢三花植脂淡奶在汤菜制作，汁酱调配、咖喱调制，以及在面点调馅与面皮制作等一系列过程中的极致应用。通过激烈角逐，大赛最终每组评出特金奖各1名、金奖各2名，银奖各3名。此次大赛为来自全国多个地区的餐饮人提供了同台竞技、交流合作的良好机会，厨师们学习到了雀巢三花植脂淡奶的更多中餐用法，对自己未来菜品的设计与创新多了一份启迪和期待，同时也提高了“三花”品牌及雀巢三花植脂淡奶的知名度，为今后该产品在菜品创新中的应用推广奠定了坚实的基础，相信不久中餐餐饮界将会掀起一股“三花”菜品的热潮。
上海龙都美食俱乐部举行成立仪式
现场
《穿越火线》职业联盟电视联赛(简称CFPL)是由腾讯游戏主办、GTV游戏竞技频道承办的首届电视联赛。CFPL第一季度线下总决赛即将于2012年2月24日正式开启，4月8日结束。
GTV的CFPL演播室坐落在北京的东五环，交通情况称不上便捷，但据GTV制作总监蒋睿对本刊记者的介绍：500平米的演播室能容纳多达150名观众，每场比赛时都是爆满的场景。
后台
舞台前的灯光、音效和精彩的比赛是电视直播可以提给大家带来的直观感受，在舞台后方，正是有了如此专业的设备以及辛勤的工作人员，电视直播才可以给大家带来如此完美的比赛体验。在对滕林季的采访中，他提到的“千万投资”则大部分都用来购买这些机器上，而在日常消耗、维修、保养、折旧等费用上，每月的投入也非常巨大。
包装
从赛前化妆、登台，到赛后接受采访、感谢大家、与前来的粉丝合影留念……这些所谓“小”的细节也成为了电视联赛最重要的因素。蒋睿对本刊记者说：“韩国对于选手的包装走在我们的前列，但我们有信心赶超他们。”
起居
CFPL为选手提供的住宿在GTV所在地不远的―个公寓式酒店内，而每天的饮食则在GTV自己的员工食堂。在本刊记者抵达食堂时(食堂其实就在训练室的隔壁)，发现选手们习惯将饭拿到训练室来吃，而白鲨则坐在电脑前没有去吃。
随后白鲨对本刊记者说，作为南方人的他们有些吃不惯北方的菜，所以他们只好每天叫肯德基来填饱肚子。但北方人的马哲倒是觉得GTV的饭菜很不错，非常实在的说道：“我感觉挺好吃的，我们一群兄弟感觉啥都行。”
汉宫Clan.Zz的队长李飞是所有队员中块头最大的，记者也特地采访了他对这届电视联赛的饮食、起居是否满意。“都挺好的”李飞习惯了这里的生活，“希望这种线下赛更多一些，大家一起线下训练、比赛，效率非常高。”
训练
在滕林季所强调的“比赛精彩度”中，选手全部来线下打比赛成为了非常重要的一条标准。而对于中国选手来说，来线下进行1个半月甚至2个月的集训、比赛也似乎有些吃不消，这其中，GTV为选手考虑的。
来自东珈精鹰的队长“白鲨”对本刊记者说：“1个月的训练，太闷了!”究其原因，与比赛期间队员不准随便出入训练场地有关。白鲨说：“我们的队员已经1个月没有出去走走了，每天只能面对电脑，真的很想赛事方为我们选手考虑考虑，可以在没有比赛时出去玩玩。”
而日照路虎的队长马哲也对本刊记者提到了同样的问题；“1个月没出去走动，确实有些闷，但我比较懒，不是很想运动，可是困扰我们最大的问题是训练室的网速非常卡，平时训练很有问题。”可见，GTV在第一次做线下大型电视联赛，要为选手们做到的细节还需要很多。
这两个队伍都进入了最终的决赛，看来，这届CFPL的电视联赛不但是两队实力的考验，也是两队意志力的一种较量。
PGL：有关电视联赛最美好的回忆
周奕
2006年PGL算是当年有关电竞最热门的话题，这种热门程度一直延续到他离开我们的视线。应该说这个比赛伴随着中国魔兽的兴起而兴起，而在比赛模式上，PGL团队几乎在照抄韩国星际争霸比赛的体制；一年分为若干赛季，每个赛季选手集中在一起在他们的演播室决出冠军。在当时他们给中国电竞制造了一个概念：场地并不重要，有没有现场观众也不重要，重要的是让人们通过直播看上精彩的比赛。所以明星+变态的直播场次成为了PGL的代名词。而为了更加贴近电视联赛，PGL还拥有自己的直播机构：Gamebank。可以说PGL是目前为止最像电视联赛的电竞比赛，只不过他并没有在电视上真正的出现过。
PGL给我们诠释了一个电视联赛的本质：天生就是为了转播，或者说其率质就是将比赛这一产品长期稳定的卖给那些客户，即观众。
PGL实践了将近4年，最终还是停止了前进的脚步。
Experimental study on apoptosis of ovarian cancer cells and reversal docetaxel drug resistance induced by Survivin antisense RNA
【Abstract】 AIM: To establish Survivin antisense RNA and explore its effect on the apoptosis of ovarian cancer cells and the sensitivity to docetaxel and its mechanism of reversing docetaxel drug resistance. METHODS: Survivin antisense eukaryotic vector (antipcDNA3svv) was transferred into Skov3 cells by electroporation and positive clone was screened out. Survivin protein was detected by Western blot; effect of apoptosis inducement was observed by flow cytometry; sensitivity to docetaxel was examined by MTT; expression of MDR1 mRNA was detected. RESULTS: Survivin protein of positively cloned cells were reduced obviously as compared with that of nontransfered cells. Terminal apoptotic change was observed by flow cytometry and the apoptosis rate was 19%; IC50 of experimental group to docetaxel was （13.3±2.25） ng/mL and control group was (53.2±2.45) ng/mL， so the statistical difference was significant (P
【Keywords】 survivin antisense RNA; ovarian neoplasms; apoptosis; docetaxel; MDR1
【摘要】 目的: 构建Survivin反义真核表达载体（antipcDNA3svv），探讨其对卵巢癌的凋亡诱导作用、对多西他赛的化疗增敏作用及逆转耐药的机制. 方法：采用Survivin反义核酸瞬时电转染法转染卵巢癌细胞系Skov3， 筛选出阳性细胞株. 以Western blot检测Survivin蛋白的表达，用流式细胞仪检测其对Skov3的凋亡诱导作用，采用MTT法检测其对多西他赛的化疗增敏作用，并检测实验组细胞（Skov3SVVanti）MDR1 mRNA的表达. 结果：稳定表达antipcDNA3svv的Skov3SVVanti其Survivin蛋白表达比未转染者明显降低，Skov3SVVanti组细胞流式细胞仪检测显示其凋亡率为19%，对多西他赛的IC50值为（13.3±2.25）ng/mL，而对照组（Skov3）为(53.2±2.45) ng/mL，差异具有明显的统计学意义(P
【关键词】 Survivin反义核酸；卵巢肿瘤；凋亡；多西他赛；多药耐药基因
0引言
上皮性卵巢癌是常见的妇科肿瘤，具有易转移及复发的特性，因此手术后化疗是卵巢癌规范化治疗最重要的内容之一. 多西他赛（docetaxel）又名泰索帝是治疗卵巢癌的新药，其联合铂类治疗卵巢癌临床缓解率远高于铂类联合其他化疗药. 但是对于一些复发和多处转移的患者，多西他赛也产生了耐药现象. Survivin是新近发现的IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族成员，能抑制caspase 活性而发挥抗凋亡作用. 已有研究证实［1］，Survivin基因的高表达与化疗耐药有密切关系，抑制Survivin基因的表达能增加肿瘤组织对化疗的敏感性，对于维持正常细胞生物学特性具有重要作用［2］. 本研究旨在研究应用反义策略阻断Survivin表达，对诱导卵巢癌细胞凋亡及提高卵巢癌细胞多西他赛敏感性的作用，并进一步探讨其逆转耐药的机制.
1材料和方法
1.1细胞株和细胞培养人卵巢癌细胞株Skov3由哈尔滨医科大学肿瘤研究所惠赠. 用含有100 mL/L胎牛血清（Gibco公司）的RPMI 1640（Gibco公司）培养（37℃，50 mL/L CO2）. 顺铂（F.H.Faulding & Co Ltd公司）及多西他赛（Aventis Pharma， Dagenham公司）溶解于DMSO(Gibco公司)，4℃保存.
1.2Survivin反义真核表达载体（antipcDNA3svv）的构建Survivin基因通过RTPCR方法克隆获得. 应用Trizol（Takara公司）法从卵巢癌细胞株Skov3中抽提总RNA，正向引物为5′atattctagaccatgggtgccccgacgttgc3′，反向引物5′aatcgaattctcaat ccatggcagccagctg3′. PCR扩增条件为：94℃预变性2 min，94℃ 1 min，60℃ 1 min，72℃ 1 min，共30循环，72℃延伸10 min，扩增产物用琼脂糖回收试剂盒回收提纯后，扩增产物进行末端连接腺嘌呤（A）反应，与带有胸腺嘧啶末端（T）的载体pcDNA3.1(Invitrogen公司，DNA3.1/CTGFPTOPO)连接. 重组体转化感受态大肠杆菌DH5α，筛选Amp阳性克隆者小量抽提质粒（质粒抽提试剂盒Takara公司），送去测序（上海生工公司）. 经测序，选出其中反向连接者，命名为antipcDNA3svv.
1.3电转染Skov3细胞及阳性克隆的筛选收集6×106细胞于预冷的0.2 cm电转杯中，加入antipcDNA3svv 15 μL，终体积800 μL， 300 V电压电穿孔14.4 ms，48 h后传代培养，加入含有G418的培养基筛选阳性克隆，浓度由200 mg/L渐加至800 mg/L，共筛选42 d，可见有抗性细胞生长，命名为Skov3SVVanti. 上述同样条件空质粒pcDNA3.1转染Skov3，筛选出阳性克隆命名为Skov3neo. 分为3组：Skov3SVVanti组（实验组）、Skov3neo组（空质粒组）及Skov3组（空白对照组）.
1.4转染细胞Survivin蛋白表达的检测将3组细胞培养48 h，PBS漂洗3次后加入4℃的50 μL裂解液，冰浴20 min，12 000 g/min离心后取上清液. Bradford法测定蛋白浓度. 取每种样品各40 μg，100 g/L SDS PAGE凝胶电泳分离，通过点转移法将蛋白质从SDS PAGE凝胶转移至硝酸纤维素膜后在含有50 g/L脱脂奶粉的TTBS中37℃封闭90 min，加入1∶1000羊抗人Survivin（上海中山公司），4℃过夜，TTBS充分漂洗后加入1∶4000兔抗羊lgG/HRP（上海中山公司），室温孵育1 h，TTBS充分漂洗，洗膜后加入LumiGLO化学发光试剂作用1 min. X线暗室曝光，常规显影定影. 同样实验条件重复4次. 图像以Bio Rad图像分析系统分析，用蛋白条带的平均光强度值表示Survivin表达的相对强度.
1.5流式细胞仪观察肿瘤细胞凋亡细胞传代培养48 h后，收集10×106个细胞，分成10个样本，每个样本1×106个细胞. 用700 mL/L的乙醇0℃固定，过夜，PBS洗涤并重悬细胞，加入PI染液1 mL（EB 10 μg，PI 50 μg， RNaseⅠ酶10 μg， 枸橼酸钠5 mg， TritonX100为0.4 μL，加生理盐水至1 mL），室温下孵育30 min，流式细胞仪检测. 观察亚二倍体峰的变化. 凋亡率采用上述样本的均值. 结果以lysisⅡ软件分析.
1.6Skov3SVVanti细胞对多西他赛敏感性分析（MTT）备96孔板，每孔加入100 μL的1×105的Skov3，Skov3neo，Skov3SVVanti细胞，每种细胞加7孔，其中1孔做调零用，每孔依次加入0，1，10，20，50，100 (μg/L)多西他赛， 37℃培养48 h后，每孔加入MTT（10 g/L） 10 μL，培养4 h，弃上清液，每孔加入150 μL二甲基亚枫（DMSO），振荡10 min，酶标仪测定490 nm处吸光度（A）值. 根据A值计算细胞存活率并计算细胞生长抑制50%的多西他赛浓度，即IC50值. 记录加多西他赛50 μg/L后0，24，48，72 h细胞生长曲线. 上述实验重复三次，取均值. 三组间IC50比较采用采用方差分析进行.
1.7反义Survivin核酸对MDR1 mRNA表达的影响上述3组细胞利用Trizol(Takara公司)法提取总RNA，RTPCR法扩增MDR1 mRNA，进行比较. MDR1的上、下游引物分别为为：5′CTACAATGAGCTGCGTGTGGC3′；5′CAGGTCCAGACGCAGGATGGC3′，扩增片段412 bp. 以βactin为内参照（上、下游引物分别为：5′CTACAATGAGCTGCGTGTGGC3′；5′CAGGTCCAGACGCAGGATGGC3′，扩增片段127 bp）. 扩增产物用20 g/L琼脂糖电泳，根据条带亮度的不同进行分析. MDR指数：MDR值/βactin值. 三组间MDR指数比较采用方差分析.
2结果
2.1重组质粒的构建和鉴定利用RTPCR方法从Skov3细胞克隆出Survivin基因，全长451 bp，经电泳证实扩增片段与预先设计片段大小一致. 与载体pcDNA3.1以AT策略连接后转化感受态大肠杆菌，挑取阳性克隆酶切鉴定，再经上海生工公司测序与基因库中序列完全符合（图1），选取其中与pcDNA3.1反向连接者命名为antipcDNA3svv. 由此得到真核表达载体.
2.2转染后稳定表达反义Survivin细胞克隆的获取阴性转染细胞在G418 800 mg/L浓度时死亡，阳性转染细胞渐形成单细胞克隆Skov3SVVanti（图2）. 采用胰酶定点消化的方法，将单细胞克隆洗脱到25 mL细胞培养瓶，进行传代培养，培养成含有antipcDNA3svv的细胞株.
2.3转染antipcDNA3svv对Skov3中Survivin蛋白表达的影响Western blot印迹法显示Skov3SVVanti组Survivin蛋白表达较Skov3neo组和Skov3组明显降低，应用计算机对条带净密度进行分析Skov3SVVanti组Survivin蛋白的表达仅为Skov3neo组的29.1%，为Skov3组23.7%.
2.4流式细胞仪检测细胞凋亡率转染antipcDNA3svv组Skov3细胞亚二倍体峰较转染空质粒组和未转染组都明显为高，10个样本平均凋亡率达到19%，而转染空质粒组及未转染组均为2%（图3）.
2.5antipcDNA3svv增加Skov3对多西他赛敏感性的检测各组细胞随着多西他赛药物浓度的提高，细胞存活率都呈下降趋势，但antipcDNA3svv组下降更加明显(表1)，其IC50值为（13.3±2.25） μg/L，而Skov3neo组和Skov3组分别为(48.7±1.12) μg/L和(53.2±2.45) μg/L，与Skov3neo组和Skov3组相比，Skov3SVVanti组的IC50值明显下降，差异具有显著性（P
2.6各组细胞MDR1 mRNA的表达分别从Skov3，Skov3neo，Skov3SVVanti细胞中提取MDR1 mRNA，发现转染antipcDNA3svv的Skov3SVVanti其MDR1 mRNA表达较其他两组明显降低，而不影响βactin的表达，转染空质粒组比对照组MDR1 mRNA表达亦有下降. 各组MDR指数分别为：0.196±0.013(Skov3SVVanti组)，3.126±0.019（Skov3组），2.958±0.024（Skov3neo组）. 经方差分析， Skov3SVVanti与Skov3neo，Skov3细胞的MDR1 mRNA表达量之间存在差异性（P
3讨论
Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins，IAP）家族的新成员，其表达产物具有独特的结构，能够保护特定的细胞抵抗一系列刺激原诱导，具有凋亡抑制、血管保护、调节细胞周期等多种生物学活性. Survivin特异性的表达于胚胎和发育的胎儿组织中，在成人终末分化组织无表达，而在各种肿瘤组织如肺小细胞肺癌、胃癌中则有广泛表达［3-4］. Survivin独特的组织分布使得抑制Survivin蛋白的表达不会对机体产生较大的影响，使其成为肿瘤反义治疗理想的靶基因.
细胞凋亡通路的异常在恶性肿瘤中很常见，凋亡异常使得细胞逃脱正常的监控机制，从而发生细胞分裂的异常以及对放疗、化疗的耐受. 生存素的高表达可能使得卵巢癌细胞更容易逃避G0/G1期和G2/M期的分子检查机制而不发生细胞凋亡. 本研究中成功构建了反义真核表达载体antipcDNA3svv，转染入Skov3细胞，并且筛选出稳定表达antipcDNA3svv的细胞株. 通过Western blot证实稳定表达antipcDNA3svv的实验组其生存蛋白表达明显下降. 在流式细胞仪的检测中实验组可见到一个明显的亚二倍体峰（凋亡峰），而在转染空质粒组则没有，实验组的细胞凋亡率是空质粒组的8.5倍，说明转染antipcDNA3svv的细胞株其凋亡率明显升高. 上述结果表明本实验所构建的antipcDNA3svv转染Skov3细胞后对Survivin蛋白的阻断及对肿瘤细胞的凋亡诱导作用是确切的.
在实性肿瘤中，生存素的过度表达与肿瘤对化疗药物的耐药性有关［5］. 化疗耐药性的产生是影响疗效的关键因素，肿瘤细胞凋亡机制的缺陷是耐药性产生的关键因素之一，对细胞凋亡机制的修复可增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，克服耐药性的产生. 多西他赛又名泰索帝，是新发现的多西紫杉醇，药物作用机制与紫杉醇一致，在GTP不足的情况下，诱导β微管蛋白的广泛聚合，使微管积集成束，非常稳定，从而发挥其杀肿瘤作用. 本研究中发现实验组生存素蛋白表达明显下降，对多西他赛的敏感性明显上升，其IC50值为约13 μg/L，而空质粒组和空白对照组分别约为48 μg/L和52 μg/L，具有明显的统计学意义. 在多西他赛药物浓度为50 μg/L，从药物作用6 h起，实验组就与对照组显示出明显的生存差异，实验组细胞生存率明显下降. Muenchen等［6］研究证实Survivin的表达阻断了PC3细胞中的半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶Caspase3和Caspase7的活性，同时保护肿瘤细胞不受抗肿瘤药物如多西他赛的影响. 有研究显示稳定转染野生型Survivin的卵巢癌细胞对多西他赛的抗药性是对照组的6倍［7］. 本研究中稳定转染反义Survivin的卵巢癌细胞对多西他赛的敏感性是转染空质粒组3.7倍，是未转染组的4倍，实验结果表明抑制生存素的表达对增加卵巢癌对多西他赛的敏感性起着至关重要的作用.
实验结果并提示实验组对多西他赛化疗敏感性的增加有可能与MDR基因表达的下降有关.
综上所述，我们在体外实验中证实了抑制生存素可以诱导卵巢癌细胞的凋亡，并且增加卵巢癌细胞对多西他赛的敏感性，通过抑制生存素的表达及联合化疗药物的应用可能会使卵巢癌在不久的将来得到更为有效的治疗，为反义生存素的临床应用提供新的思路.
参考文献
［1］Chandele A，Prasad V，Jagtap JC，et al. Upregulation of Survivin in G2/M cells and inhibition of caspase 9 activity enhances resistance in staurosporineinduced apoptosis［J］. Neoplasia， 2004，6(1):29-40.
［2］甄海宁，章翔，王西玲，等. Survivin在2株人脑胶质瘤细胞系中的表达［J］. 第四军医大学学报，2005，26（1）：57-58.
［3］Falleni M， Pellegrini C， Marchetti A，et al. Survivin gene expression in earlystage nonsmall cell lung cancer［J］. J Pathol， 2003，200(5):620-626.
［4］姚学权，刘福坤，祁晓萍，等. 胃腺癌组织Survivin基因的表达与细胞增殖及凋亡的相关性研究［J］.中华外科杂志， 2004，42(3):145-148.
［5］Shah MA. Recent developments in the treatment of gastric carcinoma［J］. Curr Oncol Rep，2002， 4: 193-201.
［6］Muenchen HJ， Poncza PJ， Pienta KJ. Different docetaxelinduced apoptotic pathways are present in prostate cancer cell lines LNCaP andPC3［J］. Urology， 2001，57(2):366-370.
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一、传统媒体携手新媒体，精细化分工，构建强大主流舆论场
武汉马拉松是武汉近年来最大的一场赛事活动，虽然是第一次在市内举办马拉松，但武汉给自已定下了创办全国一流的目标。。。
。。马拉松对于武汉很多市民来说相对陌生，在赛事前五天，汉马持续霸占当地报纸头条，每天至少2个版面的造势，在其他城市也实属罕见，吊足了市民的胃口，也充分普及了马拉松文化以及赛事礼仪。
《长江日报》推出了手绘“跟着汉马玩转武汉”的联通版，集中展示武汉的景观，体现武汉人文之城、历史之城和现代之城的气魄；；。
《武汉晚报》选取两个关键词：“大城”、“活力”，准确地表现了4月10日的武汉，从早晨7点一直疯狂到下午5点的全民热情！头版头条刊发重头稿件《2万选手奔跑在最美赛道，百万市民成粉丝激情助威，“汉马”燃爆一座大城的活力》有深度，有气势！
；《长江日报》、《武汉晚报》与旗下的汉网全程互动都体现了这种分工与融合。；看楚天APP与楚天都市报合作，提前制作“汉马”专题，推出“我在汉马互动H5”，推介本次汉马的路程和风景。。。
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二、运用新媒介技术，各展所长，创新传播形态和内容
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电视直播刷新纪录。武汉马拉松比赛全程42.195公里，囊括了江汉关、晴川桥、长江大桥、黄鹤楼、以及美轮美奂的东湖等，武汉所有的核心景观资源，被誉为世界上最美的赛道。然而同样也因为地理环境特殊，湖泊多、桥梁多，武汉马拉松赛道路线复杂程度在中国首屈一指，对电视直播也提出更高的要求。这次湖北广播电视台体育生活频道4个半小时的汉马电视现场直播刷新了湖北电视直播新纪录，搭建了一个“全程无缝・融媒多点”的全高清直播系统，共有29个固定或移动摄像机位、4台高清转播车、3台高清卫星车、2台4G摩托车、一台直升机，4个单边信号注入点。。
。。。只要记者个人的思想、观点出现偏颇，将会出现错误的舆论导向。
。错误的引导了舆论，此后国奥队招来了国内外的一片骂声，由此可见舆论引导的重要作用。
正确的舆论导向需要有良好的大局观、整体观。。而作为一个整体的事物，按照系统论的基本原理：“一切事物都以系统方式存在，因而都可以用系统观点来考察，用系统方法来描述；现实世界不存在没有任何内在相关性的事物群体”。。。
首先是遵循新闻规律，充分发挥新闻媒介的信息沟通功能。正确有效地引导社会舆论，是客观需要，也是社会主义新闻事业的优势和特点，是新闻机构的优良传统。其次是抓住苗头，及时正确引导舆论。。再次是设置议题，主动通过议题设置来巧妙地引导舆论。。例如国奥队斗殴事件就可以设置一个议题进行讨论，从而主动引导受众的思想。最后是树立典型，倡导正向舆论。。
2.坚持真实性原则
真实是新闻的生命。体育记者要清醒地认识到，以牺牲新闻真实性为代价换取眼前利益是一种短视行为，无异于自毁根基，最终必定失去发展的基础。在新闻工作中，体育记者要坚持新闻真实原则，把抵制虚假新闻作为体育记者最基本的从业要求和坚定的职业信念。
。。中国体育记者做到公平、公正与客观，不要附加个人感彩于其中。。而对于记者本身来说也应该放下功利心理，认真做好本职工作。。学习新闻学传播学基本原理。。。其三，对于所接到的一些报料消息，要及时考证核实，坚持眼见为实的观点。。。。
3.加强体育素养培养
。在体育专业中有一个专门的术语把类似的比赛项目归纳在一起，叫做“项群”。。
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。。可以说，从获得北京奥运会赞助商资格开始，搜狐就利用作为唯一媒体类赞助商的身份，将所有能够获得的权益进行了淋漓尽致地开发。。。
。在正式获得NBA网络直播权益之前，网民在网上看到的只能是比赛进程的文字描述，这远不能满足网民的需求。。。
。作为这一权益的授权方央视网之所以首选选择搜狐，是综合考虑的结果。。拥有奥运赛事新媒体传播权益的央视网以奥运传播效果最大化为目标，搜狐无疑是最佳合作选择对象。而促成这次合作的更深层原因还在于双方在一年前就已经签署的战略合作协议，明确双方要在重大的活动方面一起来做推广，在技术研发以及内容制作等各方面互相支持以实现优势互补。。。所有这些，都是希望携央视在电视媒体领域中的领先优势，在新媒体领域要有所突破的央视网所需要的重要资源。因此，此次双方的合作都是以最强的资源所做的对接，是一次双赢的合作。
。。反观搜狐，也一直在寻找这样一条跨越之路。。。。
在新媒体风起云涌的今天，电视依然是奥运赛事传播的主要渠道，而央视作为中国大陆地区独家电视媒体和新媒体播出机构，也成为企业搭车事件营销和体育营销的主要平台。电视观众在伦敦奥运会期间的收视习惯和特点将会怎样？企业应该如何看待伦敦奥运的商业价值，并投入其中？
受众：回归常态超越常态
一线城市受众看待奥运冷静理性，媒体使用多元化且新媒体使用率高，互动参与意愿强烈；。
四年前的北京奥运令央视体育频道总监江和平永生难忘。。而伦敦奥运就是要回归到常态。
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奥运期间，电视的收视率会出现一个明显的增长，这是历届奥运期间收视的一个明显的特点，据统计，2008年北京奥运会期间，全国电视整体收视上涨30%，雅典奥运会期间也曾增长了17%。
根据多年奥运收视数据的研究，奥运期间，开闭幕式转播、重要赛事转播的收视率往往是最高的，例如北京奥运会开闭幕式的收视率分别达到了20.78%和18.58%(正常收视率为1%左右)，而中国夺金项目的转播收视率也都比较高，例如羽毛球、跳水、乒乓球、田径等项目。重点赛事将是伦敦奥运会最稳定的收视保证。
调查显示：一线城市受众看待奥运冷静理性，媒体使用多元化且新媒体使用率高，互动参与意愿强烈。而受众更认可国际化大品牌的实力和营销手段，对奥运营销方式的要求也最高，互动参与感是他们最喜欢的。在奥运媒体运用上，受众接触的类型最为广泛。其中网络、微博、户外媒体使用意愿最高。
。。在对奥运赞助商的品牌认知上，李宁等国内实力品牌在二三线城市的地位非常稳固。对于体现企业实力的大手笔赞助和明星代言广告的反应最为积极。传统的中国优势项目更受欢迎。
广告主：把握赛事超越广告
如果企业预算相对充足，希望在奥运期间借助超高的收视率扩大品牌影响力，可以多选赛事套装广告，尤其选择那些中国优势项目和夺金希望大的赛事转播，收视率会有保障。
根据昌荣传播与英德知联恒所做的中国人的奥运心态调查，“跳水”“游泳”“乒乓球”是中国受众感兴趣程度最高的三项体育赛事，也是中国传统优势项目。。
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。”吴磊表示。
对于企业而言，企业在开展奥运营销时，不应把目光仅仅锁定在16天的比赛，而应该结合奥运前、奥运中和奥运后，进行广告、公关、线下活动、产品创新等系统的规划和宣传。
传统的硬广，经过这么多年的提价，价格相对来说比较昂贵，对于预算有限的企业，可以考虑在硬广投放的同时，结合线下的活动，整合新媒体资源，开展灵活的软性合作，在外围参与策划奥运的事件营销。例如，2008年奥运会中国电信就与央视体育频道合作，开通了体育频道热线118114，尽管中国电信不是北京奥运会合作伙伴，但很多受众通过这个热线，加深了对中国电信参与奥运的认知。
实力媒体电视投资管理总监谭莉敏认为，如果企业预算相对充足，希望在奥运期间借助超高的收视率扩大品牌影响力，可以多选赛事套装广告，尤其选择那些中国优势项目和夺金希望大的赛事转播，收视率会有保障，但是赛事套装广告的投入也是比较高的，目前看，很多国际品牌客户对赛事套装广告比较有兴趣。如果企业预算相对有限，谭莉敏建议选择部分赛事和专题栏目相结合的方式，这样在奥运期间可以有个比较均衡的曝光机会。
营销：成熟商业模式下创意很难
经历了北京奥运会的疯狂和过度投入，伦敦奥运对于中国企业而言将会冷静和理性很多，最明显的就是体育用品企业。
北京奥运会将中国受众对奥运的激情释放殆尽，很多人担心，到了伦敦奥运会会出现审美疲劳，奥运热情下降。
对此，吴磊觉得，伦敦奥运虽然无法企及北京奥运，但奥运作为全球最顶级的综合赛事，广告价值还是不可低估的，眼球效应巨大，还会形成收视热点，是企业进行事件营销的重要机会。。
但是吴磊表示，经历了北京奥运会的疯狂和过度投入，伦敦奥运对于中国企业而言将会冷静和理性很多，最明显的就是体育用品企业，相对于北京奥运会，估计伦敦奥运这些企业的广告投放凶猛程度将有所下降；而与此同时，这几年正在快速崛起的电商企业却非常重视伦敦奥运这个机会，京东商城、苏宁易购、腾讯都将在伦敦奥运期间扎堆曝光；此外，高附加值的银行等金融企业以及快消品企业的参与度也仍然会比较高。
事实上，中国企业参与奥运的事件营销也由浅到深经历了三个发展阶段，对于奥运营销，央视广经中心副主任何海明认为，企业应该根据自身的营销目标来选择不同的参与方式。在第一阶段，企业看中的是奥运转播的收视率高，只要简单的投放，就可以带来很高的收视率，广告效果比较好。
在第二阶段，一些本土企业开始把自己的广告产品和奥运主题结合起来，比如请参与奥运的运动员当代言人，或者专门拍摄围绕奥运主题的电视广告。
在第三阶段，一些企业开始把营销活动和奥运元素结合起来，有线上线下活动的配合。
直播 体育赛事 世界杯
。。。。。中国互联网络信息中心（CNNIC）2009年7月数据表明，网络用户规模4.2亿，普及率31.8%；宽带用户数量3.6亿，占网民总体98.1%；。。。。
国人第一次通过电视观看的世界杯是1978年阿根廷世界杯。当时的中央电视台录播了阿根廷队参加的半决赛以及阿根廷和荷兰之间进行的决赛。4年后1982年的西班牙世界杯，中央电视台第一次直播了世界杯。。以后每届世界杯央视都对其进行转播。时光荏苒，世界杯比赛网络直播真正形成规模是在2006年德国世界杯上。。。
经国际足联（FIFA）和中央电视台授权，中国网络电视家享有在中国大陆地区对2010年南非世界杯足球赛决赛阶段比赛（包括但不限于开幕式、闭幕式、比赛赛事以及由赛事衍生的各项活动）通过互联网、手机移动等新媒体平台进行转播（包括实时转播、延时转播和点播）的权利。本届世界杯是全球首次通过新媒体进行直播，是中国新媒体首次进行世界杯全程直播，中国网络电视台（CNTV）首次成为中国大陆地区世界杯独家新媒体转播机构。。3G互联网时代到来，球迷们不但可以通过传统的电视机观看球赛，更可以通过无所不在的网络终端收看世界杯球赛。。。。。。
。。在传统的电视直播中，由于电视信号资源的有限性，使得在同一时段不能传送不同的体育赛事节目，对于广大观众而言没有多少选择的自由，一切信号的发送都是在电视台的既定节目计划表里面“顺序的不可变和节目传送的单向都剥夺了观众的观看选择权”。。
。第二，可以多场比赛同时直播。传统的电视直播只能提供一场比赛的图像信号，网络则可以多场同时进行，只要多打开几个窗口就能实现。据记者了解，随着网速的提高，球迷在一台电脑上同时观看几场比赛正在成为现实。。电视台的转播虽然会有重播，但时间完全不受观众支配，网络方面的这一优势更是让电视望尘莫及。。。。传统的电视和球迷的互动停留在短信层面，据记者了解，因为上了此前不少“短信陷阱”的当，不少球迷对向电视台发短信还心存顾虑。。
。。由于中国网络电视台CNTV是国内唯一享有2010年南非世界杯在中国大陆转播权的新媒体，所以任何互联网公司欲播放世界杯节目都必须和CNTV合作。出于对自身权益的一种保护，CNTV仅仅开放了世界杯的点播权，即所有互联网合作伙伴在转播世界杯节目时都会延时3分钟。。而这对一个球迷来说，观看比赛的兴致和激情就会大打折扣。
。。。搜狐支付一定费用，直接将比赛的信号切换到自己的直播页面，此前的片花制作和比赛集锦由搜狐自己完成。。。2006年末，国家相关部门又重申了网络电视的直播规范，将多家网络电视台查封。。
。首先是转播的清晰度很差，整个画面模模糊糊，人物的表情根本看不出，球类要的精彩之处就在于球员很多动作的细节变化，而这点网络直播无法满足。其次是画面的流畅程度太低，比赛画面总是断断续续的，让人看着着急，享受比赛更是无从谈起了。
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参考文献：
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3.郭庆光：《传播学教程》，中国人民大学出版社，2001年版，第155～156页。